Стандарты производства микробиоты для фекальной трансплантации в Transbiom

Кандидат заполняет первичную обзорную анкету с вопросами об образе жизни и здоровье, проходит осмотр врача и сдаёт анализы крови и кала. В активный пул попадают только те кандидаты, которые по результатам скрининга соответствуют критериям безопасности. Этапы скрининга и перечень анализов приведены в протоколе скрининга донора. После допуска мы вносим сведения о доноре в регистр.

Донор сдаёт свой стул на пункте сбора материала в одноразовый стерильный анаэробный контейнер, и мы начинаем лабораторную обработку не позднее двух часов после сбора. На ключевых этапах работаем при температуре от +4 до +8 °C и ограничиваем контакт материала с воздухом, чтобы защитить анаэробные бактерии от воздействия кислорода. До добавления криопротектора отбираем контрольные пробы, чтобы при необходимости повторно исследовать исходный материал.

Дополнительно проверяем образец из подготовленной партии методом полимеразной цепной реакции на возбудителей острых кишечных инфекций. Мы проверяем не только донора, но и материал, предназначенный для передачи клинике. Это дополнительный этап контроля безопасности: он помогает выявить генетический материал возбудителей, включённых в панель анализа, и не допустить передачу партии с положительным результатом.

Значимость такой проверки подтверждают данные о случаях передачи патогенной кишечной палочки при трансплантации микробиоты. В описанном расследовании молекулярный анализ выявил возбудителя в образцах донаций, которые ранее дали отрицательный результат при иммуноферментном тестировании. После этих случаев Управление по контролю качества пищевых продуктов и лекарственных средств США рекомендовало молекулярные тесты на два патогенных типа кишечной палочки и исключение положительных образцов из использования.

Время, температуру и результаты проверок фиксируем в документации партии. Если установленный срок до начала обработки превышен, образец отбраковываем.

После обработки замораживаем материал и контрольные пробы при −80 °C. Каждой партии присваиваем уникальный идентификатор и оставляем её на карантине на 12 недель по нашему протоколу. За это время донор проходит повторный скрининг: панель патогенов и полный контур проверки донора. Он помогает выявить инфекции с инкубационным периодом, которые могли ещё не определяться при первичном обследовании. Такой подход соответствует рекомендациям Объединённой европейской гастроэнтерологической ассоциации по организации банков микробиоты: материал остаётся в карантине до получения результатов повторных проверок и допуска донора.

Замораживание позволяет дождаться этих результатов до применения материала. В рандомизированном исследовании, опубликованном в журнале Американской медицинской ассоциации, замороженный и затем размороженный материал показал сопоставимую эффективность со свежим при лечении с помощью фекальной трансплантации повторяющейся или не поддающейся лечению инфекции Clostridioides difficile.

Заморозка микробиоты даёт главное преимущество перед материалом, используемым сразу после получения: дополнительную проверку донора до передачи партии клинике. Хранение также позволяет заранее сформировать запас допущенного материала и выдавать его по мере необходимости. Партию передаём клинике только после получения результатов и решения о допуске. Контрольные пробы сохраняем для дополнительных исследований, как предусмотрено в рекомендациях по организации банков микробиоты и хранению образцов для повторных проверок.

В конце карантина сверяем результаты повторного скрининга донора, лабораторных анализов партии и проверок на этапах обработки. Проверяем полноту записей и разбираем зафиксированные отклонения. Пока результаты не получены или остаются вопросы по соответствию требованиям, партию не передаём клинике.

Если партия соответствует критериям допуска, оформляем решение о выпуске и сертификат анализа с результатами проверок и условиями хранения. По идентификатору партии можно проследить её связь с донором, исходным материалом и документацией обработки. Решение о выпуске подписывает ответственный специалист, его фамилию и дату решения фиксируем в документах партии.

Если выявлены нарушения, исключающие допуск, партию отклоняем и направляем на утилизацию по установленной процедуре. Причину отказа и сведения об утилизации фиксируем в документации.

После выпуска обе контрольные пробы храним отдельно от переданного материала: нативную пробу исходного материала и пробу подготовленной партии. Если появляются основания для дополнительной проверки, мы исследуем эти пробы и проверяем остальные партии того же донора. Клиники, которым переданы такие партии, получают от нас сообщение о проверке и её результатах.